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人蛋白激酶PKA试剂盒
产品简介:

人蛋白激酶PKA试剂盒用于定量检测血清、血浆、组织匀浆等样本中PKA浓度。采用双抗体夹心法,灵敏度高(zui低可达1.0ng/ml),检测范围广。另有PKA活性检测试剂盒及磷酸化PKA检测试剂盒可供选择。

产品型号:

更新时间:2026-03-18

厂商性质:生产厂家

访 问 量 :396

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产品介绍

人蛋白激酶PKA试剂盒

人蛋白激酶PKA试剂盒,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,可快速、精准定量检测人相关样本中人蛋白激酶PKA的含量及活性相关水平,是专为人类PKA科研检测、细胞信号传导调控、相关疾病机制及病理过程研究设计的专用试剂盒。
蛋白激酶PKA又称cAMP依赖性蛋白激酶,是一种丝an酸/苏an酸蛋白激酶,广泛存在于人体各种组织细胞中,是细胞内cAMP信号通路的核心下游效应分子。其核心生理功能是通过cAMP激活后,催化下游靶蛋白的丝an酸/苏an酸残基磷酸化,进而调控细胞增殖、分化、凋亡、代谢、基因表达及信号传导等多种生理过程。PKA的活性及含量异常与多种疾病密切相关,其异常激活或表达可见于肿瘤(如肺癌、乳腺癌、结肠癌)、心血管疾病、神经系统疾病、代谢性疾病及炎症反应等,是研究细胞信号传导机制、疾病发病规律及药物干预效果评价的重要科研标志物,可用于相关疾病的基础科研、药物筛选及疗效评估。
本试剂盒组分齐全、活性稳定、特异性强,基于高特异性抗原抗体反应,可有效排除样本中其他蛋白激酶(如PKC、ERK)、杂蛋白及无关抗原的干扰,操作便捷且检测结果准确可靠,广泛应用于人细胞信号传导机制研究、肿瘤疾病模型探究、心血管疾病科研、药物筛选与效果评价等领域,为科研人员提供高效、便捷的PKA定量及活性相关检测工具。本试剂盒仅用于科研用途,不用于临床诊断。

检测原理

本试剂盒基于酶联免疫吸附测定(ELISA)的双抗体夹心法原理,结合特异性抗原抗体反应及酶催化显色反应,实现对人蛋白激酶PKA的定量检测,同时可间接反映PKA的活性水平,该原理可高效捕获样本中的PKA,显著提高检测的灵敏度与特异性,有效降低非特异性信号干扰,适配细胞信号传导、肿瘤及心血管疾病相关科研需求。
试剂盒包被板预先包被人蛋白激酶PKA特异性捕获抗体,向反应孔中加入样本或标准品后,样本中PKA会与包被的捕获抗体特异性结合,形成抗体-抗原复合物;随后加入HRP标记的抗人PKA酶标检测抗体,检测抗体与复合物中的PKA特异性结合,形成“捕获抗体-PKA-酶标检测抗体"的夹心复合物,未结合的游离检测抗体经洗涤步骤去除;加入TMB底物液后,HRP会催化底物发生显色反应,显色强度与样本中PKA的含量呈正相关,进而间接反映其活性水平;最后加入硫酸终止液终止反应,通过酶标仪读取吸光度值(波长参考450nm),结合标准曲线即可定量计算出样本中PKA的具体含量,进而辅助分析其在细胞信号传导、疾病发病及病理过程中的作用机制。
本试剂盒采用高特异性PKA捕获抗体及酶标检测抗体,可精准识别人蛋白激酶PKA,有效避免与PKC、ERK等其他蛋白激酶、杂蛋白及无关抗原发生交叉反应,确保检测结果的特异性与准确性,适配不同生理病理状态下低浓度、低活性PKA样本的精准检测需求,契合丝an酸/苏an酸激酶类物质的检测特点。

产品特点

  • 特异性强:采用高纯度人蛋白激酶PKA特异性捕获抗体及酶标检测抗体,可精准识别人PKA,与PKC、ERK等其他蛋白激酶、杂蛋白及无关抗原无交叉反应,有效规避交叉干扰,保障检测结果的特异性与准确性,适配人细胞信号传导、肿瘤、心血管疾病及神经系统疾病相关科研样本检测场景。

  • 灵敏度高:优化的抗原抗体结合体系及底物反应体系,检测下限低,可精准捕捉样本中低浓度、低活性PKA(zui低检测浓度可达pg/mL级别),满足疾病早期、药物干预后、信号传导异常等低含量PKA检测需求,契合PKA活性动态变化、组织分布广泛的检测特点。

  • 稳定性佳:各组分(包被板、酶标抗体、标准品、底物液等)经严格质量控制,采用优化配方与保存工艺,规定条件下活性稳定,批内、批间差异小,重复检测结果一致性好,降低实验误差,保障科研数据可靠,符合试剂盒储存及使用的核心要求,尤其适配激酶类试剂的活性保存需求。

  • 操作便捷:采用标准化ELISA操作流程,步骤清晰、耗时短,无需复杂实验设备,普通实验室即可完成;配套完整试剂及详细说明书,新手可快速上手,适配批量样本检测,兼顾高效性与实用性,适配肿瘤、细胞信号传导相关样本批量筛查、疾病动态监测需求。

  • 无菌安全:所有试剂均经支原体、细菌、真菌检测,结果均为阴性,无外源污染物;包被板经无菌处理,可直接使用,避免污染导致的检测异常,保障实验过程的安全性与结果可靠性,尤其适配血清、肿瘤组织、细胞培养上清、细胞裂解液等科研样本检测。

  • 定量精准:标准品浓度梯度精准,可绘制出线性良好的标准曲线,能准确量化样本中PKA含量,同时间接反映其活性水平,有效减少样本基质效应的影响,为细胞信号传导机制、肿瘤发病机制、药物干预效果评价相关科研数据提供可靠支撑,适配科研实验的定量分析需求。

适用样本类型

本试剂盒适用于人多种样本类型的PKA定量及活性相关检测,具体包括:
  • 血清样本(zui常用,适配全身PKA水平及活性监测,尤其适用于肿瘤、心血管疾病相关科研)

  • 血浆样本(EDTA、肝素抗凝均可,抗凝剂对检测结果无干扰,适配凝血相关科研场景下的PKA检测)

  • 细胞培养上清液、细胞裂解液(如肿瘤细胞、心肌细胞、神经细胞、免疫细胞培养上清及裂解液等,适配细胞信号传导、细胞增殖分化相关研究)

  • 组织匀浆样本(如肿瘤组织、心肌组织、脑组织、肝脏组织等与PKA高表达相关的组织匀浆)

  • 腹水、脑脊液样本(适配肿瘤转移、中枢神经系统疾病相关科研检测,特异性较高)

备注:(具体样本处理方法请参考产品说明书,其中细胞裂解液、组织匀浆样本需快速低温处理,避免PKA酶活性丧失;血清/血浆样本采集后尽快离心分离并低温保存,避免溶血、脂血;细胞培养上清及裂解液需及时收集,避免反复冻融导致酶活性下降;肿瘤、心肌组织样本需剔除血管、结缔组织等杂质,确保样本纯度)

储存与注意事项

(一)储存条件

  1. 试剂盒未开封时,需置于2-8℃冷藏避光储存,严禁冷冻(特殊说明除外),储存环境相对湿度控制在40%-60%,防止试剂受潮、活性流失,避免光照导致试剂成分发生光化学反应,影响酶活性及产品性能,试剂盒有效期为12个月(详见外包装盒)。

  2. 标准品、酶标抗体、底物液等敏感性组分,开封后需密封冷藏,2-8℃条件下可保存1个月,建议分装成小剂量使用,避免反复开封导致酶活性下降,同时避免将试剂稀释后长期储存。

  3. 包被板开封后,剩余板条需密封放入自封袋,加入干燥剂,2-8℃冷藏储存,1个月内用完,避免吸潮、污染,确保包被PKA捕获抗体的免疫学活性不受影响。

  4. 洗涤液(浓缩型)开封后,2-8℃冷藏储存可保存3个月,使用前需用新鲜蒸馏水或去离子水稀释,稀释后现配现用,避免稀释液变质影响洗涤效果,进而影响检测准确性。

  5. 试剂盒有效期详见外包装盒,超过有效期的试剂严禁使用;储存过程中若发现试剂浑浊、沉淀、颜色异常,或酶类组分活性下降,需立即丢弃,不可使用。

(二)注意事项

  1. 实验前,将所有试剂从冰箱取出,置于室温(20-25℃)平衡30分钟,避免试剂温度与实验环境差异过大,影响抗原抗体结合及酶催化效率,平衡过程中试剂需密封,避免吸潮或污染,尤其注意保护酶类组分的活性。

  2. 操作全程需遵循无菌操作规范,实验器具提前灭菌,避免手接触试剂及包被板反应孔,防止交叉污染,同时确保储存及操作环境无腐蚀性气体、无强酸强碱干扰,避免损害试剂盒组分及PKA酶活性,尤其处理细胞裂解液、肿瘤组织样本时需严格无菌操作。

  3. 加样时需用移液枪精准加样,避免加样量偏差;加样后轻轻震荡混匀,避免剧烈震荡导致试剂溅出或抗原抗体结合受阻,同时减少样本基质效应的影响,组织匀浆、细胞裂解液样本加样时需轻柔操作,避免杂质干扰及酶活性破坏。

  4. 洗涤步骤需规范,每次洗涤后将包被板倒扣在吸水纸上拍干,避免残留洗涤液导致背景值升高,影响检测结果,确保去除未结合的游离物质,建议洗涤次数不少于5次,避免残留酶类组分干扰显色反应。

  5. 底物液需避光保存,使用时避免强光照射;显色时间严格按照说明书控制,显色完成后立即加入终止液,避免显色过度或不足,确保显色信号稳定,保障PKA定量及活性相关检测的准确性。

  6. 终止液为酸性溶液,操作时需佩戴手套、护目镜,避免接触皮肤和黏膜;若不慎接触,立即用大量清水冲洗,保障操作安全;同时避免终止液与酶类试剂直接接触,防止酶活性瞬间丧失影响检测。

  7. 检测完成后,酶标仪读取吸光度值需在终止反应后10分钟内完成,避免显色褪色导致结果偏差,确保检测数据的准确性,适配PKA含量及活性动态监测的科研需求。

  8. 样本需新鲜采集,避免溶血、脂血、污染;PKA为丝an酸/苏an酸激酶类物质,样本处理过程中全程低温操作,避免高温、反复冻融导致酶活性丧失、蛋白降解,影响检测结果,尤其细胞裂解液、肿瘤组织样本需快速处理、低温保存,采集后尽快离心分离上清液;组织样本需剔除坏死、血管、结缔组织等杂质,确保样本纯度。

  9. 样本及试剂废液、实验废弃物需按照生物安全规范妥善处理,避免环境污染,符合科研实验安全要求,细胞裂解液、肿瘤组织样本废弃物需按生物危险废物规范处理;含酶类试剂的废液需单独处理,避免污染环境。

  10. 不同品牌、不同批次的试剂盒组分不可混用,避免因组分差异导致检测结果异常,确保实验数据的可靠性;同时避免与PKC、ERK等其他蛋白激酶检测相关试剂混用,防止交叉干扰,避免影响PKA酶活性检测。

订购信息

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以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。


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