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人水通道蛋白2试剂盒
产品简介:

人水通道蛋白2试剂盒​用于定量检测人血清、尿液等样本中AQP-2含量。AQP-2是肾集合管水通道蛋白,采用双抗体夹心ELISA法,检测范围0.31-20 ng/mL,灵敏度达0.122-0.19 ng/mL,适用于肾脏功能研究。

产品型号:

更新时间:2026-03-13

厂商性质:生产厂家

访 问 量 :426

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产品介绍

人水通道蛋白2试剂盒

人水通道蛋白2试剂盒(Human Aquaporin 2, AQP-2 Kit)是一款专门用于体外定量检测人来源生物样本中水通道蛋白2(AQP-2)含量的专用实验试剂组合,核心应用于基础科研、临床前研究领域,尤其适配人体肾脏水重吸收、体液平衡调控、肾脏上皮细胞功能及相关疾病(肾脏疾病、尿崩症、水肿、电解质紊乱)研究。水通道蛋白2(Aquaporin 2, AQP-2)是水通道蛋白家族的关键成员,属于经典水通道蛋白,主要表达于人肾脏远曲小管和集合管上皮细胞,广泛存在于人肾脏组织、尿液、血清及相关细胞样本中,核心功能是介导水分子跨肾小管上皮细胞转运,调控肾脏对水的重吸收过程,维持机体体液平衡、渗透压稳定及尿量调节,其表达及含量异常与人体肾脏水重吸收障碍、尿崩症、肾功能损伤、水肿及电解质紊乱密切相关,是相关疾病机制研究、肾脏水代谢功能评估及靶向药物筛选的核心检测指标。本试剂盒基于酶联免疫吸附(ELISA)原理设计,集成了检测所需全部试剂,具备特异性强、灵敏度高、操作便捷、结果稳定、物种针对性强等优势,可快速、精准完成人各类样本中水通道蛋白2的定量检测,为人肾脏水代谢、体液平衡调控相关科研实验提供标准化、可靠的数据支撑,适配不同科研场景的检测需求。

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法ELISA原理,专门针对人水通道蛋白2优化反应体系,有效规避人体内其他水通道蛋白家族成员(如AQP-1、AQP-3)、肾脏上皮细胞相关蛋白及杂蛋白的交叉干扰,确保检测精准度与适用性,契合肾脏水转运相关蛋白检测的核心需求:
酶标板预先包被人水通道蛋白2特异性捕获抗体,实验时依次加入人样本、标准品及HRP标记的人水通道蛋白2检测抗体,经37℃恒温温育后,抗体与样本/标准品中的AQP-2特异性结合,形成“捕获抗体-AQP-2-检测抗体"复合物;经彻di洗涤去除未结合的多余试剂(如未结合的检测抗体、杂蛋白、组织基质杂质)后,加入TMB底物液,TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,加入终止液(硫酸溶液)后变为黄色,颜色深浅与样本中人水通道蛋白2的含量呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),结合标准曲线即可计算出样本中人水通道蛋白2的具体含量。该原理适配低浓度水通道蛋白检测,可有效避免组织基质杂质、其他水通道蛋白的非特异性结合,保障检测结果的准确性,尤其适配人肾脏组织匀浆、尿液样本、肾小管上皮细胞培养液等低浓度AQP-2样本的精准检测。

产品特点

1.  物种特异性强,无交叉干扰:采用人水通道蛋白2专属特异性单克隆抗体,可特异性识别人来源样本中的AQP-2,有效规避小鼠、大鼠等其他物种同源水通道蛋白及人体内AQP-1、AQP-3等其他水通道蛋白家族成员、肾脏上皮细胞相关蛋白的干扰,同时避免样本中杂蛋白、组织基质杂质的非特异性结合,确保检测结果的准确性,批内变异系数CV<5%,板间变异系数CV<8%,交叉反应率<5%,保障实验数据重复性。
2.  灵敏度高,检测范围广:ELISA法检测范围通常为1-100ng/mL,灵敏度可达0.5ng/mL,可精准检测人低浓度样本(如人血清、血浆、肾脏组织匀浆、尿液、肾小管上皮细胞培养液)中的水通道蛋白2,满足不同科研样本的检测需求,标准曲线相关系数R²≥0.99,线性表现优异,适配人体生理及病理状态下的含量变化检测,可精准区分正常、肾脏水代谢异常状态下的AQP-2水平差异。
3.  操作便捷,效率高效:试剂盒包含检测所需全部试剂(预包被酶标板、冻干标准品、HRP标记的检测抗体、浓缩洗涤液、TMB底物液、终止液、封板膜等),无需额外配制核心试剂,实验流程简化,全程可在1-2小时内完成,适配96孔板高通量设计,单次可检测96个样本,大幅提升实验效率,新手也可轻松操作。
4.  稳定性好,保质期长:试剂经严格质检与工艺优化,冻干标准品、特异性抗体及底物活性稳定,未开封试剂盒按要求储存可稳定保存12个月以上,稀释后的试剂可短期冷藏使用,避免反复冻融导致的活性下降,确保不同批次实验结果的一致性,保障实验重复性;标准品采用专用蛋白保护缓冲液配制,密封性好,可有效防止降解,进一步提升试剂稳定性。
5.  适配性广,场景多元:专门适配人来源样本检测,兼容人血清、血浆(EDTA或肝素抗凝)、组织匀浆(肾脏、膀胱、肺组织等)、细胞培养液(肾小管上皮细胞、肾脏集合管细胞等)、细胞裂解液、尿液等多种样本类型,广泛应用于人肾脏水重吸收、体液平衡调控、肾脏疾病、尿崩症、水肿、电解质紊乱等相关科研领域,适配基础科研、靶向药物筛选、肾脏水代谢功能评估等实验场景。
6.  安全便捷,风险可控:优化试剂配方,无需氯仿、二氯甲烷等有毒有机溶剂,操作过程更安全,同时配套详细说明书,明确操作步骤、样本处理及注意事项,降低实验失误概率,保障实验安全与顺利进行;试剂组分均经过无菌检测,可有效避免污染风险,适配常规科研实验室操作。

适用样本类型

本试剂盒专门适配人来源样本,可满足人肾脏水代谢、体液平衡调控相关科研实验的多样化检测需求,具体适用样本包括:人血清、血浆(EDTA或肝素抗凝)、组织匀浆(肾脏、膀胱、肺组织等)、细胞培养液(肾小管上皮细胞、肾脏集合管细胞等)、细胞裂解液、尿液。其中,组织匀浆需用预冷PBS(含蛋白酶抑制剂更佳)制备,低温冰浴操作,防止AQP-2降解;血清/血浆样本采集后需低温离心处理,避免溶血,新鲜样本优先检测,若无法立即检测需分装冷冻保存,避免反复冻融;尿液样本需新鲜采集,低温离心去除杂质,避免微生物污染导致AQP-2降解;细胞裂解液需避免剧烈震荡,防止蛋白变性,确保检测准确性;组织样本采集后及时处理,避免杂质干扰,保障AQP-2活性。(具体样本处理方法请参考产品说明书)

储存与注意事项

(一)储存条件

1.  未开封试剂盒:需置于2-8℃避光密封保存,避免阳光直射、温度波动及潮湿环境,严禁冷冻,未开封试剂盒有效期通常为12个月,具体以说明书标注为准。
2.  组分储存:冻干标准品、人水通道蛋白2特异性抗体、TMB底物液等核心组分需置于-20℃避光保存,避免反复冻融(≤3次),防止活性丧失;浓缩洗涤液可在2-8℃冷藏保存;标准品及抗体母液稀释后需存放于4℃,切勿放-20℃低温处,以免降低效价,稀释后的抗体避免存放超过1天;建议在样本处理时添加少量蛋白酶抑制剂,防止AQP-2降解。
3.  稀释后试剂:稀释后的洗涤液可在4℃冷藏保存,1周内用完;稀释后的标准品、HRP标记检测抗体需现配现用,未用完的可短期冷藏,避免反复冻融及光照;试剂配制需注意保质期,夏季即使冷藏也需避免批量配制过多,防止变质。
4.  运输条件:运输时采用凝胶冷藏包,确保试剂温度稳定在2-8℃,避免剧烈震荡、暴晒及ji端温度,防止试剂失效,尤其注意保护抗体及底物,避免光照直射和温度骤变。

(二)注意事项

1.  实验全程需严格遵循无菌操作规范,实验器具需提前高压灭菌处理,加样时使用无菌枪头,避免试剂及样本污染,尤其是组织匀浆、尿液和血浆样本,污染会导致检测结果偏高;实验台面需保持清洁,避免试剂交叉污染,减少基质效应对检测结果的影响。
2.  试剂使用前需从冰箱取出,置于室温(25℃左右)平衡30分钟以上,避免温差导致冷凝水干扰实验;试剂配制及加样时动作轻柔,避免剧烈震荡,防止试剂失效或抗原抗体变性,同时避免AQP-2降解,抗体与样本孵育时避免剧烈晃动,确保抗原抗体充分结合;实验用蒸馏水或去离子水需新鲜、高质量,自配缓冲液需检测pH值。
3.  孵育及显色过程需严格控制温度和时间,尤其是显色反应需避光进行,避免光照影响显色效果;终止反应后需在10分钟内完成读数,防止颜色消退,确保检测数据稳定,同时避免过度孵育导致非特异性显色。
4.  不同批次的试剂不可混用,试剂盒配套试剂需单独使用,避免与其他试剂盒试剂交叉使用,防止干扰实验结果;实验结束后,废弃试剂及耗材需按生物安全规范妥善处理,避免污染环境;含终止液的废液需单独收集处理,避免腐蚀设备。
5.  操作含硫酸的终止液时,需佩戴手套、口罩、护目镜,避免皮肤接触及吸入,防止刺激伤害;实验台面需保持清洁,避免试剂洒落,若不慎接触皮肤,需立即用大量清水冲洗;试剂瓶盖需及时盖紧,防止挥发和污染。
6.  若样本中人水通道蛋白2含量超出检测范围,需适当稀释后重新检测,不可直接检测,以免导致结果偏差;检测过程中可设置阳性对照、阴性对照和空白对照,确保实验体系正常,阳性对照孔吸光度需落在标准曲线范围内,否则提示实验失效;样本需新鲜采集处理,全程低温操作并添加蛋白酶抑制剂,避免长时间放置或反复冻融导致AQP-2降解,影响检测结果;样本中不可含NaN3,以免抑制HRP活性导致假阴性;避免样本中组织基质杂质或尿液杂质过多,可提前离心纯化处理。

订购信息

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以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。

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